水溶性药物伊立替康是喜树碱类抗肿瘤衍生物，是拓扑异构酶（Topo-Ⅰ）的特异性抑制剂，研究表明，多种肿瘤细胞，特别是结肠癌、宫颈癌、卵巢癌等细胞内的Topo-Ⅰ含量大大高于正常组织，尤其在S 期肿瘤细胞中含量大幅提高。伊立替康具有独特的作用机制，对上述肿瘤细胞有较高的选择性，是治疗晚期大肠癌的特效药，对 5- 氟尿嘧啶产生耐药性的病例仍然有效，目前已经上市的剂型主要为注射剂和粉针剂，为降低药物在使用过程中的毒副作用和增加药物的肿瘤靶向性，研究制备成脂质体。

1.方法与结果 

1.1 脂质体制备方法的考察 

1.1.1 薄膜分散法 

       取大豆磷脂40mg、胆固醇10mg，声溶解于5mL无水乙醇中，旋转蒸发仪减压除去有机溶剂，形成均匀的磷脂薄膜，加 2mL伊立替康PBS缓冲液进行洗脱，分别过 0.8、0.45、0.22μm的微孔滤膜得脂质体。 

1.1.2 改良薄膜分散法 

       取大豆磷脂40mg、胆固醇10mg，溶于5mL无水乙醇中，加入药物溶液0.5mL于有机相中，超声5min 后减压旋转蒸发至成均匀磷脂薄膜，于真空干燥箱过夜进一步除去有机溶剂后，加2mL伊立替康PBS缓冲液进行洗脱，水浴得脂质体。 

1.1.3 逆向蒸发法 

       大豆磷脂40mg、胆固醇10mg，溶于5mL无水乙醇中，加入药物的PBS缓冲溶液2mL，探针声成乳浊液，静止10min稳定无明显分层，减压除有机溶剂，真空静置过夜进一步除去有机溶剂，得脂质体。 

1.1.4 乙醇注入法 

       将大豆磷脂40mg、胆固醇10mg以及药物的水溶液溶入乙醇中，将该溶液经注射器缓缓注入加热至50℃（声仪混合均匀）的磷酸盐缓冲溶液中， 继续声10min，转移至旋转蒸发仪上，抽真空加速乙醇的挥出，即得。

1.1.5 硫酸铵梯度法 

       大豆磷脂40mg、胆固醇10mg，溶于5mL乙醇中，旋转蒸发仪减压除去有机溶剂，形成均匀的磷脂薄膜，加4mL硫酸铵50℃水浴洗脱磷脂膜， 将制得的脂质体转移到透析袋中，于0.9% 的氯化钠溶液中透析24h，取出透析后的空白脂质体，加入 2mL 药物溶液，于60℃水浴中孵化10min，得脂质体。

1.2 包封率的测定 

      采用阳离子交换树脂法分离脂质体与游离药物。各取上述几种方法制备的脂质体0.5mL 各两份，一份于阳离子交换树脂柱顶预饱和5min，去离子水洗脱，收集滴出液于25mL容量瓶中，破膜剂破坏后，去离子水定容 ；另一份直接置于25mL 容量瓶 中，同样方法处理。HPLC法测定药物脂质体包封率。结果见图1，改良薄膜分散法制备的脂质体包封率可高达。

微射流高压均质机连接在线挤出器

                                                                                                                                                              CHEN231012M