白藜芦醇是一种天然多酚类物质，具有抗癌、抑制血小板凝集、调节雌激素等生理功能。其广泛分布于虎杖、葡萄、花生等植物中，且被美国《抗衰老圣典》列为“100 种较热门有效的抗衰老物质”之一。将纳米脂质体用于白藜芦醇的包封与载运，有利于提高白藜芦醇生物利用率与缓释作用，可进一步扩大其在药品、食品、化妆品等行业的应用范围。

　　纳米脂质体、微球、脂肪乳、胶束等都是新的药物载体形式。其中载药脂质体，是以卵磷脂、胆固醇等为膜材对亲水或者疏水的药物进行包封，制成的一种具有类似生物膜结构的双分子层球体结构，具有稳定性好、靶向性强、无免疫毒性等特点，已成为近年来现代医学和食品功能化学共同关注的焦点。

　　高压微射流法作为一种新型纳米脂质体制备技术，通过高速撞击、剪切与空化作用达到均质与细化的目的，具有操作简便、清洁安全、易于连续化生产等优点。现已有用于制备阿糖苷、茶多酚及维生素 C等纳米脂质体的实例。

　　本文介绍高压微射流法制备白藜芦醇纳米脂质体，探寻一种环保、高效的白藜芦醇纳米脂质体制备工艺，为白藜芦醇新剂型的开发及利用提供理论依据和实际指导。

　　仪器与设备

　　Mini DeBEE 型微射流高压均质机( 美国 BEE 公司)

　　高效液相色谱仪( 配有紫外和示差检测器，美国 Waters 公司)

　   ＲE5220 型旋转蒸发仪、DLSB 型低温冷却液循环泵( 上海振捷试验设备有限公司)

　　材料与试剂

　　白藜芦醇标准品、VE、白藜芦醇样品等

　　实验步骤与结果：

　　1. 白藜芦醇纳米脂质体的制备流程

　　1）称取处方量的卵磷脂、胆固醇、白藜芦醇、抗氧化剂 VE，加入 500 mL 无水乙醇，于 45 HZ、240 W 条件下水浴声 3 min 至充分溶解，45 ℃ 水浴条件下减压( 真空度 － 0. 09 MPa) 旋转蒸发除去乙醇，直至茄形瓶壁上形成一层均匀的脂质薄膜。

　　2）加入 0. 01 mol/L磷酸盐缓冲液( pH 值 7. 4) 和适量玻璃珠，45 ℃ 水浴条件下旋转水合 30 min，得到白藜芦醇脂质体粗悬液。

　　3）将其于微射流高压均质机中均质分散，即得到白藜芦醇纳米脂质体。

　　2. 工艺优化试验

　　实验设计思路（以微射流技术为主）：

　　单因素基本条件为固定卵磷脂质量为 1 g、卵磷脂 /VE /白藜芦醇 /胆固醇 = 10∶1∶1∶1、磷酸盐缓冲液用量为 250 mL、微射流处理压力 18 000 PSI、循环次数 3 次。各因素对白藜芦醇纳米脂质体包封率的影响设计见表 1。

表1 单因素水平设计

　　1）高压微射流压力对包封率的影响

　　由图1 可知，随着高压微射流处理压力的增加，白藜芦醇纳米脂质体包封率逐渐增加，在18 000 PSI 时达到大至。当压力在18 000 ～ 30000 PSI 范围内，包封率随着压力的增加而降低。这是由于脂溶性的白藜芦醇主要是包裹或穿插于磷脂双分子层内，高压微射流处理压力的增加导致脂质体的比表面积增大，使白藜芦醇包裹量相应增加; 当处理压力过大时，脂质体结构被机械力破坏，导致部分白藜芦醇漏泄，包封率降低。

图1 微射流高压均质压力对包封率影响

　　2）微射流循环次数对包封率的影响

　　微射流循环次数对白藜芦醇纳米脂质体包封率的影响如图2 所示，随着高压微射流循环次数的增加，白藜芦醇纳米脂质体包封率迅速增加，在3 次循环时达到大至值87. 25%。循环次数继续增加时，纳米脂质体结构受到机械破坏，包封率逐渐降低。

图2 微射流高压均质循环次数对包封率影响

　　通过单因素试验和响应面分析研究，确立高压微射流法制备白藜芦醇纳米脂质体较佳工艺条件为: 卵磷脂/VE = 10∶1、卵磷脂/白藜芦醇= 11. 6∶1、卵磷脂/胆固醇= 10. 5∶1、磷酸盐缓冲液用量为250 mL、微射流压力18 366 PSI、循环次数3 次，在此条件下白藜芦醇纳米脂质体包封率为87. 74% ± 1. 01%。各因素对白藜芦醇提取率的影响顺序为: 微射流压力＞ 卵磷脂/白藜芦醇＞ 卵磷脂/胆固醇＞ 循环次数＞ 卵磷脂/VE。

图3.微射流高压均质机

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