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高压微射流均质法制备二十二碳六烯酸藻油脂质体及其性质分析
二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)是一种长链多不饱和脂肪酸。研究表明,DHA具有预防心血管疾病、促进大脑发育、缓解阿尔茨海默病等多种生理功能。相比于DHA鱼油,DHA藻油受到的污染少、鱼腥味弱、资源更加丰富,且研究发现DHA藻油食用更加安全,藻类中的DHA很少引起胃肠道不适。然而,DHA不饱和度高,容易受到光、热、氧等不同因素的影响,极易氧化产生氢过氧化物,失去其功能活性及营养价值,这种不稳定性限制了其应用范围。
本研究采用薄膜分散与高压微射流均质技术结合的方法,以DHA藻油脂质体的平均粒径、包封率为主要评价指标进行DHA藻油脂质体制备的单因素试验及响应面优化试验,并考察DHA藻油脂质体物理稳定性、贮藏稳定性及氧化稳定性,旨在开发一种低粒径、较高载量、稳定性好的脂质体运载体系,以便DHA藻油在药品、食品实际加工生产中的应用。
1. 材料
DHA藻油(DHA纯度≥40%);大豆磷脂;胆固醇;吐温-80
2. 制备方法
将一定量的大豆磷脂、胆固醇、DHA藻油脂溶性物质加入到适量无水乙醇中,用磁力搅拌器搅拌均匀,在45 ℃、真空条件下旋转蒸发除去无水乙醇形成薄膜,将吐温-80加入到0.01 mol/L、pH 7.2的PBS中搅拌均匀,再将PBS倒入装有薄膜容器中振荡水合得到脂质体,用高压微射流均质机在一定压力下处理若干次得到DHA藻油脂质体。
3. DHA藻油脂质体的表征
(1)微观结构
图一 放大倍数为60000×(A)、200000×(B)的透射电子显微镜图
DHA藻油脂质体几乎呈球体,分布均匀,与平均粒径测定的结果一致。
(2)粒径
图二:DHA藻油脂质体粒径;A时均质后;B是未均质
平均粒径为(59.35±3.05)nm,PDI为0.189±0.025,包封率为(94.2±2.9)%。
(3)DSC曲线
图三 MF-L(均质)和C-L(未均质)的DSC分析曲线
与C-L相比,MF-L提高了相变温度,峰值温度由95.49 ℃提高到111.67 ℃,且具有更小的相变焓,因此磷脂双层膜更加稳定。
(4)过氧化值
图四 MF-L(均质)和C-L(未均质)在不同贮藏温度与时间下的过氧化值
随着贮藏时间的延长,4 ℃条件下MF-L和C-L的过氧化值都缓慢增长,且MF-L的过氧化值涨幅低于C-L。