透明质酸脂质体的制备

透明质酸，又称玻尿酸，它是一种属于糖胺聚糖的多糖，是细胞基质的主要成分。作为一种分子多糖，透明质酸是皮肤和其他组织中固有的天然物质，可渗入皮肤表皮层，与人体组织完美融合，被称作最天然健康的“保湿因子”，具有营养皮肤、保湿锁水、修复等功效。人工合成的透明质酸生物相容性与生物可降解性好、无毒性且无免疫原性，已被证实其具有作为一种应用广泛的生物活性分子的功效，不仅用于胚胎发育、伤口愈合、血管生成方面，而且在治疗动脉粥样硬化、癌症和其他病理状况等方面也有所应用。透皮递送是非常重要的药物递送方式，可通过皮肤达到全身或局部给药效果，然而，透明质酸分子量大，难以透过皮肤角质层进入深层皮肤，目前临床多使用注射方式进行透明质酸递送，一方面具有感染风险，另一方面患者顺应性较差，且价格昂贵。

采用脂质体包裹透明质酸，不仅能有效地提高透明质酸的稳定性，还能使其在特定部位缓慢释放。因此，本实验采用脂质体技术包裹透明质酸，对透明质酸脂质体的经皮吸收性能进行研究，为透明质酸脂质体（HA-Lip）在生物医药及化妆品方面的进一步应用奠定基础。

1. 材料

透明质酸，蛋黄卵磷脂

2. 透明质酸脂质体（HA-Lip）的制备

称取蛋黄卵磷脂置于茄形瓶内，加入少量无水乙醇，制成脂质溶液；再将脂质溶液置于55℃水浴中，使其完全溶解，并通过旋转蒸发仪除去无水乙醇，旋蒸铺膜制成脂质蜂窝状薄膜；随后将制成的脂质蜂窝状薄膜与预先准备的透明质酸水溶液（1.5 mg/mL）进行水化、振荡，并充分排除气泡，制成脂质乳液；最后将制备所得的脂质乳液置于超声细胞破碎仪中超声5 min，过膜除菌，得到HA-Lip。

3. 实验结果

（1）透明质酸脂质体形态观察

观察TEM图像发现形成了具有光滑外表面的类圆球形纳米囊泡。

图一 透明质酸脂质体的TEM图像

（2）透明质酸脂质体和透明质酸溶液粒径、电位

  HA-Lip 的平均粒径为（90.70±1.20）nm，多分散性指数（PDI）为（0.241±0.021），Zeta 电位为（−40.65±0.781）mV，证明HA-Lip 均一性较好。此外 HA 的平均粒径为（11.74±11.0）nm，多分散性指数（PDI）为（0.657±0.1279），Zeta电位为（-2.794±1.94）mV，说明利用脂质体技术包裹HA，增加了HA的稳定性。

图二 粒径、电位图（A：HA-Lip粒径图；B：HA粒径图；

C：HA-Lip电位图；D：HA电位图）

（3）透明质酸脂质体稳定性 

测定28天内的稳定性，发现HA-Lip的粒径和PDI未发生明显变化，说明HA-Lip具有高度稳定性。

图三 储存期间HA-Lip的粒径、电位

微射流高压均质机

ZB 20241121